免疫组化专题:流式细胞仪检测技术实验(一)
标签: 流式 细胞仪
流式细胞仪(flow cytometer)是一种能够探测和计数以单细胞液体流形式穿过激光束的细胞检测装置,由于在检测中使用的细胞标志示踪物质为荧光标记物,因此,用来分离、鉴定细胞的流式细胞仪有被称为荧光激活细胞分类仪,是分离和鉴定细胞群及亚群的一种强而有力的应用工具。
实验方法
流式细胞仪
实验方法原理 | 流式细胞仪的使用一般分为三个步骤。第一,是仪器前阶段,包括试剂的准备,细胞制备、细胞的荧光染色;第二,是流式细胞仪阶段,主要是仪器的操作;第三,是结果分析阶段。 |
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实验材料 | 淋巴细胞 外周血的白细胞 |
试剂、试剂盒 | FACS缓冲液 PBS 叠氮钠溶液 仪器缓冲液 FACS清洁液 FACS洗净液 |
仪器、耗材 | 流式细胞仪 |
实验步骤 | 一、细胞和试剂的准备
4. FACS缓冲液: 1×PBS 950 ml FCS 40 ml 10%叠氮钠溶液 10 ml
1. 单细胞悬液的制备:将1×105~1×107的细胞放入1.5 m l离心管中3000 r/min 离心5分钟,弃上清;加入FACS缓冲液100 μl 悬浮细胞。
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