饲料中维生素E的检测
方法/原理/步骤
色谱条件
色谱柱：Hitachi-Inertsil ODS(5μm) 4.6mmI.D.x250mmL
柱温：40℃
流速：1.0 mL/min
检测波长：285nm
进样量：10μL
流动相：甲醇
溶液制备
准确称取一定量α-生育酚和dl-α-生育酚乙酸酯标准品于10ml容量瓶，用甲醇溶解并定容，作为贮备液，然后稀释得到浓度为5μg/ml的标准品溶液，用0.45μm滤膜过滤，进样测定。
称取5g饲料样品于100mL棕色具塞锥形瓶中，准确加入50ml乙醇，磁力搅拌30min后静置，取上清液于离心管中，2000转/分钟离心5min，用0.45μm滤膜过滤，进样测定。
仪器设备
仪器
1)四元梯度泵PM1110
2)自动进样器PM1210
3)柱温箱PM1310
4)紫外检测器PM1410
5) PM色谱工作站。
实验结果
1、标样测定
根据上述色谱条件，得到α-生育酚和dl-α-生育酚的色谱图，并且二者得到良好的分离，图1为生育酚标样的色谱图。
图1生育酚标样色谱图
2、线性相关性
对生育酚标准品贮备液逐级稀释，配置一系列线性溶液，分别进样测定；实验结果表明α-生育酚和dl-α-生育酚醋酸酯在1～500μg/ml浓度范围内线性关系良好，结果见下图：
图2生育酚线性关系图
图3 dl-α-生育酚醋酸酯线性关系图
3、饲料样品检测
某饲料样品经前处理后测定，检测到α-生育酚和dl-α-生育酚醋酸酯，检测结果见图4。
图4饲料样品色谱图
结论
采用日立Primaide高效液相色谱仪四元梯度配紫外检测器，准确地测定了维生素E的含量，在上述色谱条件下和杂质得到很好的分离，该方法线性关系良好。方法简便实用，紫外检测器灵敏度高，适用于常规限量检测。
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